CCK-8試劑盒是一種常用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞代謝活性檢測的實(shí)驗(yàn)工具，其主要檢測原理是基于細(xì)胞代謝活性的變化。CCK-8試劑盒中的CCK-8是一種水溶性的四唑鹽類化合物，其能夠通過線粒體呼吸鏈的活性被代謝為形成橙色的水溶性產(chǎn)物，該產(chǎn)物可以通過吸光度檢測的方式來間接反映細(xì)胞代謝活性的變化。
1、細(xì)胞接種和處理：首先，將待檢測的細(xì)胞接種在培養(yǎng)皿中，并在培養(yǎng)基中添加不同的藥物處理或其他實(shí)驗(yàn)條件，通過控制實(shí)驗(yàn)條件來研究細(xì)胞的生長和代謝活性變化。
2、加入CCK-8試劑：在實(shí)驗(yàn)處理一定時間后，將CCK-8試劑加入到細(xì)胞培養(yǎng)物中，CCK-8會被活性細(xì)胞內(nèi)的線粒體呼吸鏈代謝，形成橙色的水溶性產(chǎn)物。
3、檢測吸光度：將培養(yǎng)皿中的細(xì)胞培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至微孔板中，然后使用酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)等設(shè)備測量吸光度，通常在450納米波長下測量吸光度，橙色產(chǎn)物的光學(xué)密度與細(xì)胞代謝活性呈正相關(guān)。
4、數(shù)據(jù)分析：根據(jù)測得的吸光度值，可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線或內(nèi)部控制樣品來計(jì)算細(xì)胞的代謝活性，進(jìn)而分析不同處理?xiàng)l件對細(xì)胞生長和代謝的影響。
CCK-8試劑盒基于WST-8還原反應(yīng)的原理，通過測定細(xì)胞代謝活性相關(guān)的吸光度值，間接反映細(xì)胞的增殖和存活情況。其優(yōu)點(diǎn)在于其操作簡便、靈敏度高、結(jié)果穩(wěn)定可靠，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué)等領(lǐng)域的研究中。通過使用，可以快速、準(zhǔn)確地評估細(xì)胞的代謝活性，為細(xì)胞生物學(xué)研究提供了重要的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持。
