ecl超敏發光液在使用中務必要注意的操作步驟
1、具有*靈敏度和高信噪比,可檢測10-100fg抗原;
2、可在自然光下進行操作,無需進入暗室;
3、發光迅速,發光持續時間場;
4、可使用更高的抗體稀釋倍數(1:2000-1:10000)極其節省抗體。
ecl超敏發光液使用的操作步驟
1.在二抗孵育完畢后,將發光液從冰箱取出到室溫平衡。將印跡膜充分洗滌。
2.根據需要量,將ECL超敏發光液A和ECL超敏發光液B按照1:1的比例等體積混合,配制為化學發光檢測底物工作液(例如:一張8cm×6cm的膜使用2ml工作液,為節省試劑,初次實驗可用洗滌緩沖液測試,以少的液體蓋住整個膜的表面)。
3.棄去洗滌緩沖液,轉移到暗室或者避光盒里操作,將發光底物工作液滴加在印跡膜上,確保工作液覆蓋整張膜,室溫孵育5分鐘。
4.去掉多余發光底物工作液,將印跡膜置于兩層干凈的塑料薄膜之間,此過程應小心完成,避免膜與膜之間產生氣泡。
5.在暗室內進行X-光膠片曝光,或將膜放置到熒光、化學發光成像儀內,按照儀器說明書進行檢測。
6.因本產品發光發光超度高,發光時間長,所以為得到理想的結果,可多次曝光(不同時長)以得到理想的結果。
ecl超敏發光液使用的注意事項
1.為獲得好的實驗結果,請務必優化實驗條件,包括檢測樣品的用量、一抗、二抗稀釋度、雜交膜及封閉試劑的選擇,并且發光液請現用現配。
2.建議在封閉緩沖液及所有抗體稀釋液中加入高質量的吐溫-20(終濃度為0.05%),以減少非特異性結合。
3.由于疊氮鈉是HRP抑制劑,在緩沖液中應避免使用疊氮鈉作為防腐劑。
4.免疫印跡實驗進行全過程中,請確保印跡膜始終處于濕潤狀態,避免干燥。
5.在與膜發生接觸過程中請佩戴手套或者使用潔凈鑷子,避免蛋白污染。
6.實驗過程中,請使用潔凈器材。保證非金屬設備沒有明顯劃痕,金屬設備表面無銹。銹可能導致膜上帶有污點或者高背景。
以上便是今天關于ecl超敏發光液在使用中務必要注意的操作步驟的全部分享了,希望對大家今后使用本設備能有幫助。