DiR染料是一種近紅外熒光染料,常用于細胞標記和活細胞示蹤。它的特點是具有高度的疏水性和光穩定性,適合用于體內成像和長時間追蹤細胞。以下是正確使用
DiR染料進行細胞標記的步驟:
1、選擇適當的細胞類型:首先要選擇適合您研究目的的細胞類型,確保它們是您要研究的對象。
2、準備溶液:將其溶解在合適的溶劑中,如二甲基亞砜(DMSO)或乙醇。根據廠家提供的建議濃度來配制染料溶液。
3、染色:將溶液加入培養基中,使其終濃度在0.5-5µM之間。將培養基含有染料的溶液加入到培養皿中,然后將細胞懸浮物加入其中,輕輕搖動培養皿使細胞均勻受染。
4、孵育:將含有DiR染料的細胞培養皿放入CO2培養箱中孵育一段時間(一般為30分鐘至2小時),以確保細胞充分吸收染料。
5、洗滌:使用含有培養基的離心管洗滌細胞,去除未被吸收的多余染料。
6、觀察:將染好細胞置于熒光顯微鏡下觀察,使用適當的濾光片觀察熒光信號。
7、實驗:根據您的研究目的,可以將染有染料的細胞用于體內或體外實驗。在體內實驗中,可以將細胞注射到動物體內進行追蹤;在體外實驗中,可以進行細胞培養和功能實驗。
8、存儲:將未使用的溶液存儲于-20℃避光處,避免染料的光降解。
9、注意事項:在使用時,應注意避免與皮膚和眼睛接觸,避免吸入其蒸汽。在處理時,應佩戴實驗室手套和護目鏡。
總之,正確使用DiR染料進行細胞標記需要注意染料的配制、染色、洗滌和觀察等步驟,以確保成功標記細胞并獲得準確的實驗結果。希望以上步驟和注意事項對您有所幫助!