土壤銨態(tài)氮試劑盒-國標(biāo)法,微板法

土壤銨態(tài)氮試劑盒-國標(biāo)法,微板法

土壤銨態(tài)氮試劑盒-國標(biāo)法,微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 土壤銨態(tài)氮試劑盒說明書 （貨號：WS0230W 微板法 96 樣） 一、產(chǎn)品簡介： 氮元素以銨根離子的形態(tài)存在并流通于土壤中，為土壤銨態(tài)氮。其溶解度大，易被植物 吸收，所以常被用作化肥。本試劑盒采用氯*鉀溶液浸提，浸提液中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿的環(huán) 境下與次氯酸鹽和*酚作用，生成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液顏色穩(wěn)定。其在 625nm 處有 特征吸收峰，吸光值與銨態(tài)氮含量成正比。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格試劑名稱 保存要求 備注 提取液 液體 110mL×1 瓶 4℃保存 試劑一 粉劑×2 瓶 4℃保存 用前每瓶加入 6mL 蒸餾水，現(xiàn)配現(xiàn)用 試劑二 A：液體 10mL×1 瓶 B：液體μL×1 支 4℃保存 用前向 A 液中加入 100μL 的 B 液，混 勻后作為試劑二使用。仍 4℃保存。 試劑三 液體 2mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 液體×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、常溫離心機(jī)、移液器、蒸餾水、振蕩儀。 四、土壤銨態(tài)氮的測定： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣本情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： 稱取約 0.1g 新鮮土樣，加入 1mL 提取液，渦旋混勻，室溫振蕩提取 1h，12000rpm 常溫離心 10min，取上清液。 2、上機(jī)檢測： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，設(shè)置溫度在 25℃，設(shè)定波長為 625nm。 ② 所有試劑在使用前均須在室溫或 25℃水浴鍋中溫育 10min。 ③ 在 96 孔板中按照下表依次加入試劑： 試劑（μL） 測定管 空白管（僅做一次） 樣本 20 提取液 20 試劑一 100 100 試劑二 100 100 充分混勻，25℃靜置 1h 試劑三 20 20 充分混勻，于 625nm 處測定吸光值，分別記為 A 測定管和 A 空白管， △A=A 測定管-A 空白管。 【注】若△A 在零附近徘徊，可增加土壤質(zhì)量 W（如增至 0.3g），或在反應(yīng)階段增加樣本加 樣量 V1（如增至 80μL，則試劑一和試劑二分別減至 70μL，總體積保持不變），改變 后的 W 和 V1 需重新代入公式計算。本試劑盒僅供科研使用 五、結(jié)果計算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 6.0486x - 0.0063；x 是標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（μg），y 是△A。 2、NH4+ -N 含量(mg/kg 鮮土)=[(△A+0.0063)÷ 6.0486]÷(W×V1÷V) =8.27×(△A+0.0063)÷W V1---反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.02mL； V---加入提取液體積，1mL； W---樣本質(zhì)量，g。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 標(biāo)準(zhǔn)品母液（1mg/mL 的氮）： 2 把母液用蒸餾水稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 2,4,6, 8,10 μg/mL。也可根據(jù)實際 樣本來調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 按照測定管操作表加樣操作，依據(jù)結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2