土壤速效磷試劑盒,微板法

土壤速效磷試劑盒,微板法

土壤速效磷試劑盒,微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 土壤速效磷含量試劑盒說明書 （貨號(hào)：WS2430W 微板法 96 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 植物吸收的磷主要是 H2PO4 -的形態(tài)，因此土壤中速效磷含量是評(píng)價(jià)土壤對(duì)作物磷供應(yīng) 能力的一種手段，對(duì)于施肥有著直接的指導(dǎo)意義。 本試劑盒采用鉬銻抗混合顯色劑還原土壤中的速效磷，使黃色的鉬銻抗還原為磷鉬蘭， 在 700nm 下吸光值的大小與土壤中速效磷的含量成正比。 二、試劑盒組成和配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 提取液 粉體 g×2 瓶 常溫保存 臨用前取一瓶轉(zhuǎn)移全部粉末至盛有 450mL 蒸餾水的藍(lán)蓋瓶中，再向原試劑 瓶中加入50mL蒸餾水涮洗瓶子后全部 轉(zhuǎn)移至藍(lán)蓋瓶中，重復(fù)操作一次。總體 積為 0.55L，混勻溶解后 15 天內(nèi)用完。 試劑一 粉體 g×1 瓶 常溫保存 試劑二 A:粉體 mg×1 支 B:液體 8mL ×1 瓶 C:粉體 mg×4 支 常溫保存 臨用前向 A 中加 1.3mL 蒸餾水溶解后， 全部加入 B 中，再加 3.84mL 蒸餾水， 混勻得到 AB 液（常溫可保存 15 天）。 每支 C 中加入 3mLAB 液混合，得到試 劑二（一天內(nèi)用完）。 標(biāo)準(zhǔn)品 液體 mL×1 支 常溫保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑 【注】：全程操作需無磷環(huán)境；試劑配置用新的槍頭和玻璃移液器等，也可以用一次性塑料器皿， 免磷污染。 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、可調(diào)試移液器、水浴鍋、震蕩器。 四、土壤速效磷含量測(cè)定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： 稱取通過 40 目篩的風(fēng)干土樣 0.5g（精確稱量至 0.001g）于 10mL 有蓋離心管中，加 入一勺（約 0.05g）的試劑一，加入 10mL 的提取液，蓋緊，水平放置在震蕩器上室溫 200rpm 往復(fù)震蕩培養(yǎng) 30min，用無磷濾紙過濾，濾液收集至新的 10mL 離心管中，立即進(jìn)行測(cè)定。 2、上機(jī)檢測(cè)： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 700nm。 ② 在 EP 中依次加入下列試劑： 試劑名稱（μL） 測(cè)定管 空白管（僅做一次） 樣本 200 提取液 200 試劑二 （逐滴加入，防止溢出） 100 100 觀察產(chǎn)生大量氣泡，停止冒泡后，蓋上管蓋上下?lián)u晃后小 心打開蓋子放氣，重復(fù)操作 2-3 次，將氣泡全部排出。本試劑盒僅供科研使用 2 蒸餾水 700 700 混勻，室溫靜置 30min 后，取出 200μL 至 96 孔板中，于 700nm 下讀取各管吸光值 A，△A=A 測(cè)定-A 空白。 五、結(jié)果計(jì)算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y = 0.0236x + 0.0028，x 是標(biāo)準(zhǔn)品摩爾質(zhì)量（μg/mL）, y 是△A。 2、按樣本質(zhì)量計(jì)算： 土壤速效磷含量(μg/g )=[(△A-0.0028)÷0.0236×V]÷W =423.7×(△A-0.0028) V---加入提取液體積，10mL； W---樣本質(zhì)量，0.5g。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（50μg/mL 的磷）。 2 把母液用蒸餾水稀釋成六個(gè)濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 2, 4, 6, 8, 10. μg/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào)整 標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 依據(jù)測(cè)定管的操作方法在 EP 管中加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 200μL，提取液 200μL，試劑二 100μL， 蒸餾水 500μL。根據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。