水中氨態(tài)氮/銨根離子含量試劑盒,微板法

水中氨態(tài)氮/銨根離子含量試劑盒,微板法

水中氨態(tài)氮/銨根離子含量試劑盒,微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 水中銨根離子含量試劑盒說明書 （貨號(hào)：WS5240W 微板法 96 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 銨根離子含量是評(píng)價(jià)水質(zhì)是否受到污染的一個(gè)重要指標(biāo)，銨根離子在水中存在時(shí)呈游 離氨或銨鹽的狀態(tài)，兩者組成主要取決于水的 PH 值。 本試劑盒采用靛酚藍(lán)比色法，即在高 PH 值環(huán)境下，將水中的銨根離子轉(zhuǎn)化成銨鹽的 存在形式來進(jìn)行測(cè)定。水中銨根離子在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與*酚和次氯酸鈉作用，生成穩(wěn)定 的水溶性染料靛酚藍(lán)，吸光度與銨根離子含量成正比，其在 625nm 處有特征吸收峰。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格試劑名稱 保存要求 備注 試劑一 液體 12mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 A：液體 10mL×1 瓶 B：液體 0.2mL×1 支 4℃保存 用前向 A 液中加入 100μL 的 B 液，混 勻后作為試劑二使用。仍舊 4℃保存。 試劑三 液體 2mL×1 支 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 液體 1mL×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑。 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、常溫離心機(jī)、移液器、蒸餾水、振蕩儀。 四、水中銨根離子的測(cè)定： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： 水溶液或液體樣本，直接進(jìn)行檢測(cè)。若溶液渾濁，12000rpm 常溫離心 10min，取 上清液。 2、上機(jī)檢測(cè)： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，設(shè)置溫度在 25℃，設(shè)定波長(zhǎng)為 625nm。 ② 所有試劑在使用前均須在室溫或 25℃水浴鍋中溫育 10min。 ③ 在 96 孔板中按照下表依次加入試劑： 【注】：1、若 A 測(cè)定值大于 1.5，可對(duì)樣本用蒸餾水稀釋，則稀釋倍數(shù) D 帶入公式計(jì)算。 2、若△A 小于 0.01，可增加樣本加樣體積 V1（如由 20μL 增至 60μL 或更多，則試劑一 和試劑二分別減少 20μL，保持總體積不變）。則改變后的 V1 帶入公式計(jì)算。 試劑（μL） 測(cè)定管 空白管 樣本 20 蒸餾水 20 試劑一 100 100 試劑二 100 100 充分混勻，25℃靜置 1h 試劑三 20 20 充分混勻，于 625nm 處測(cè)定吸光值，分別記為 A 測(cè)定管和 A 空白管，△A=A 測(cè)定管-A 空白管。本試劑盒僅供科研使用 2 五、結(jié)果計(jì)算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 4.7044x-0.0063；x 是標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（μg），y 是△A。 2、水中 NH4+含量(μg/mL)=[(△A+0.0063)÷4.7044]÷V1×D =0.22×(△A+0.0063)÷V1×D 3、水中 NH4+ -N 含量(μg/mL)=[(△A+0.0063)÷ 4.7044]÷V1÷18×14×D =0.17×(△A+0.0063)÷V1×D V1---樣本加樣體積，20μL=0.02mL； D---稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 標(biāo)準(zhǔn)品母液（1mg/mL 的氮）： 2 把母液稀釋成以下濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 2,4,6, 8,10 μg/mL。也可根據(jù)實(shí)際樣本來調(diào) 整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 按照測(cè)定管操作表加樣操作，依據(jù)結(jié)果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。