蔬菜中硝酸鹽含量試劑盒,微板法

蔬菜中硝酸鹽含量試劑盒,微板法

蔬菜中硝酸鹽含量試劑盒,微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 蔬菜中硝酸鹽含量測定試劑盒說明書 （貨號：WS0440W 微板法 96 樣） 一、產品簡介： 用 pH9.6～9.7 堿性緩沖液提取樣品中硝酸根離子，同時加活性炭去除色素類，加沉 淀劑去除蛋白質及其他干擾物質，利用硝酸根離子和亞硝酸根離子在紫外區 219nm 處 具有等吸收波長的特性，測定提取液的吸光度，其測得結果為硝酸鹽和亞硝酸鹽吸光度 的總體，鑒于新鮮蔬菜、水果中亞硝酸鹽含量甚微，可忽略不計。測定結果為硝酸鹽的 吸光度，依據從標準曲線計算出硝酸鹽含量。 二、試劑盒的組成和配制： 試劑名稱 規格試劑名稱 保存要求 備注 活性炭 1g×1 支 室溫 試劑一 液體 6mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 液體 2mL×1 支 4℃保存 試劑三 液體 2mL×1 支 4℃保存 標準品 液體×1 支 4℃保存 若重新做標曲，則用到該試劑 三、所需的儀器和用品： 酶標儀、96 孔 UV 板（用于紫外光波長下的測定）、蒸餾水、常溫離心機，可調式往返 振蕩機。 四、蔬菜中硝酸鹽含量測定： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解樣本自身情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費！ 1、樣本處理： ① 組織樣本：取 0.2g 組織樣本（若樣本較大可研磨粉碎后取樣），加 1mL 的蒸餾水 研磨勻漿，全部轉移至 2mLEP 管中，再依次加入 0.06mL 試劑一和 10mg 的活性炭 混勻，放置于可調式往返振蕩機上（200 次/min）振蕩 30min(如無此儀器需間隔 3min 手動晃動幾秒)。再依次加入 0.02mL 的試劑二和 0.02mL 的試劑三，充分混勻，加 0.9mL 蒸餾水定容至 2mL，混勻后室溫放置 5min。12000rpm 室溫離心 5min，澄清 的上清液做為樣本待檢上清液；空白待檢上清液制備過程除了不加樣本之外，其他 操作步驟同組織樣本制備過程。 2、上機檢測： 1 酶標儀預熱 30min 以上。 2 在 96 孔 UV 板中依次加入： 試劑名稱（μL) 測定管 空白管（僅做一次） 樣本待檢測上清液 200 空白待檢測上清液 200 混勻， 于 219nm 分別讀吸光值 A，△A=A 測定管-A 空白管。 【注】 若 A 值超過 1.2，可用蒸餾水對待檢上清液稀釋，稀釋倍數 D 代入計算公式重新計算； 五、結果計算： 1、標準曲線方程：y = 0.0348x + 0.0029；x 為標準品濃度（μg/mL），y 為吸光值△A。本試劑盒僅供科研使用 2 2、蔬菜中硝酸鹽（NO3 -）含量(μg/g 或 mg/Kg)=(△A-0.0029)÷ 0.0348×V×D÷W =28.74×(△A-0.0029)×V×D÷W V---最終待測總體積，2mL； W---取樣質量，g； D---稀釋倍數，未稀釋即為 1。 本標準適用于新鮮蔬菜及水果中硝酸鹽含量的測定。本方法檢出限為 1.2mg/kg。 附：標準曲線制作過程： 1 標準品母液（500μg/mL）： 2 用蒸餾水把母液稀釋成六個濃度梯度的標準品：0, 4, 8, 12,16, 20. μg/mL。也可根據 實際樣本來調整標準品濃度。 3 直接取 200μL 不同濃度的標準品至 96 孔 UV 板中，于 219nm 分別讀吸光值 A，根 據結果即可制作標準曲線。