血磷含量檢測(cè)試劑盒（磷鉬酸法）,微板法

血磷含量檢測(cè)試劑盒（磷鉬酸法）,微板法

血磷含量檢測(cè)試劑盒（磷鉬酸法）,微板法

本試劑盒僅供科研使用 1 血清磷含量（磷鉬酸法）檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) （貨號(hào)：WS6121W 微板法 96 樣） 一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 樣品中的無(wú)機(jī)磷與鉬酸作用生成磷鉬酸，后者被還原成鉬藍(lán)，在 660nm 處有吸 收峰，進(jìn)而計(jì)算得出無(wú)機(jī)磷含量。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 40mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 液體 1.5mL×1 瓶 4℃保存 試劑三 液體 13mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 液體 0.5mL×1 支 4℃保存 該 標(biāo) 準(zhǔn) 品 母 液 為 3.25mmol/L ， 用 前 取 0.02mL標(biāo)準(zhǔn)品+0.48mL試劑一（稀釋 25 倍） 混勻制成 0.13 mmol/L 磷標(biāo)準(zhǔn)品，待用。 三、所需儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、可調(diào)式移液器、離心機(jī)、蒸餾水。 四、磷含量檢測(cè)： 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí) 驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、 樣本制備： 取約 0.02mL 血清至 2mLEP 管中，加 0.38mL 的試劑一（即蛋白沉淀劑），3000rpm 室 溫離心 5min，取上清液檢測(cè)。 2、上機(jī)檢測(cè)： 1 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，設(shè)定波長(zhǎng)到 660nm。 2 所有試劑解凍至室溫，按照試劑二：試劑三為 1:9 配制反應(yīng) mix（4℃避光保存 2 天）。 ③ 在 96 孔板中依次加入： 【注】若樣本 A 測(cè)定值接近空白管，可在樣本前處理步驟中增加血清取樣量 V1（如取 0.1mL 血清加 0.3mL 試劑一，混勻離心再取上清液檢測(cè)），則改變后的 V1 需代入公式重新計(jì)算。 五、結(jié)果計(jì)算： 磷含量(mmol/L)=C 標(biāo)準(zhǔn)×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白)×V÷V1 =2.6×(A 測(cè)定-A 空白)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白) C 標(biāo)準(zhǔn)--磷標(biāo)品濃度，0.13 mmol/L；V--上清液總體積，0.4mL；V1--血清取樣體積，0.02mL； 試劑名稱（μL） 測(cè)定管 標(biāo)準(zhǔn)管（僅測(cè)一次） 空白管（僅測(cè)一次） 樣本 100 標(biāo)準(zhǔn)品 100 試劑一 100 反應(yīng) mix 100 100 100 混勻，室溫放置 10min，于波長(zhǎng) 660nm 處讀取各管吸光度 A。