土壤總酚含量測定試劑盒

土壤總酚含量測定試劑盒

本試劑盒僅供科研使用 1 土壤總酚含量測定試劑盒說明書 (貨號: WS9430F 分光法 48 樣 ) 一、產(chǎn)品簡介： 土壤中的酚類物質(zhì)主要由植物釋放，以及植物殘體和凋落物分解產(chǎn)生。由于酚類物質(zhì)的 難降解性，其在土壤中的積累會影響土壤的碳氮轉(zhuǎn)化和溫室氣體排放，進而會使土壤肥力 衰退。另外，酚類物質(zhì)對土壤有機質(zhì)礦化和養(yǎng)分循環(huán)也有著重要影響。 本試劑盒采用福林酚法測定土壤中酚類物質(zhì)含量，在堿性條件下，酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還 原，產(chǎn)生藍色化合物，在 750nm 處有特征吸收峰，通過檢測在 750nm 處的吸光值，進而 計算土壤中酚類物質(zhì)含量。 二、所需的儀器和用品： 可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、可調(diào)式移液器、天平、離心機。 三、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 提取液 液體 60mL×1 瓶 4℃保存 試劑一 液體 25mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 液體 5mL×1 瓶 4℃保存 標準品 粉體 mg×1 支 4℃保存 若重新做標曲，則用到該試劑 四、土壤總酚含量的測定： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費！ 1、樣本制備： 稱取約 0.5g 土壤樣本，加入 1mL 提取液，室溫振蕩提取 30min。25℃×8000rpm，離 心 10min，取上清待測。 2、上機檢測： ① 可見分光光度計預熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 750nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 在 1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）中依次加入： 試劑名稱（µL） 測定管 空白管（僅做一次） 樣本 180 蒸餾水 180 試劑一 450 450 試劑二 90 90 混勻，25℃室溫靜置 30min，全部液體轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃 比色皿（光徑 1cm）中，測定 750nm 吸光值 A，ΔA=A 測定-A 空白。 【注】:1.吸光值大于 1.2，上清液用蒸餾水適當稀釋再測定，計算公式里乘以稀釋倍數(shù) D。 2.若ΔA 在零附近，可增加土壤取樣質(zhì)量 W，或加大樣本上樣量 V1（如增至 300µL，則 試劑一相應減少，保持總體積不變），則改變后 W 和 V1 需代入計算公式重新計算。 五、結(jié)果計算： 1、標準曲線：y = 0.0712x - 0.0036，x 是標準品質(zhì)量(µg)，y 是ΔA。本試劑盒僅供科研使用 2 2、土壤總酚含量(µg/g 土壤)=(ΔA+0.0036)÷0.0712÷(V1÷V×W)×D =78.03×(ΔA+0.0036)×V÷W×D V---加入提取液體積，1mL； V1---反應中樣品體積，0.18mL； D---稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1； W---土壤取樣質(zhì)量，g。 附：標準曲線制作過程： 1 制備標準品母液（10mg/mL）：向標準品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水，超聲*全溶解。 2 把母液用蒸餾水稀釋成五個濃度梯度的標準品：0, 0.02, 0.04, 0.06,0.08,0.1 mg/mL。 也可根據(jù)實際樣本來調(diào)整標準品濃度。 3 依據(jù)測定管的加樣體系操作，根據(jù)結(jié)果即可制作標準曲線。