溶jun酶(LZM)試劑盒

溶jun酶(LZM)試劑盒

溶jun酶(LZM)試劑盒

本試劑盒僅供科研使用 1 溶*酶（LZM）檢測試劑盒說明書 （貨號：WS7021F 分光法 48 樣） 一、產品簡介： 溶*酶又叫胞壁質酶或 N-乙酰胞壁質聚糖水解酶。能催化某些細菌細胞壁多糖的 水解，從而溶解這些細菌的細胞壁，起到殺死細菌的作用。 溶*酶可使一定濃度的渾濁菌液降解，使濁度降低，透光度增加，可通過光度變化 來測定溶*酶活性大小。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規格 保存要求 備注 試劑一 液體 40mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 粉劑 mg×2 瓶 4℃干燥保存 臨用前甩幾下使粉劑落入底部， 每支分別再加 17.8mL 試劑一渦 旋振蕩，至全部溶解備用。 標準品 粉劑 mg×1 支 -20℃保存 三、所需儀器和用品： 可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、可調式移液器、水浴鍋/恒溫培養箱、 離心機、蒸餾水。 四、溶*酶（LZM）活性檢測： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實 驗樣本和試劑浪費！ 1、 樣本制備： ① 液體樣品：澄清的液體直接檢測，若渾濁則離心后取上清液檢測。 ② 組織樣本：取約 0.1g 組織，加入 1mL 生理鹽水，進行冰浴勻漿。4℃×12000rpm 離 心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取。 2、上機檢測： ① 可見分光光度計預熱 30min，設定溫度 37℃，設定波長到 530nm，蒸餾水調零。 ② 標準品制備：臨用前甩幾下使粉劑落入底部，再加 1mL 蒸餾水充分溶解，再用蒸餾水 稀釋 100 倍（即 1：99），終濃度為 200U/mL，即 10μg/mL。 ③ 所有試劑在 37℃條件下孵育 5min。在 1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）中依次加入： 試劑（μL） 測定管 標準管（僅做一次） 樣本 40 標準品 40 試劑二 680 680 混勻，30s 于 530nm 讀取吸光值 A1，2min30s 時再 讀取 A2，△A=A1-A2。本試劑盒僅供科研使用 2 【注】：1.加完試劑二反應即開始，若是批量檢測，建議逐個測定樣本。 2. 若 A2 的值小于 0.1，可對樣本用蒸餾水稀釋后再測定。稀釋倍數 D 代入公式計算。 3. 若測定管的△A 小于 0.005，可增加樣本上清液體積 V2(如增至 80μL，則標準管多加 40μL 蒸餾水，保證兩管總體積一致)，則改變后的 V2 代入計算公式重新計算。 五、結果計算： 1、按照體積計算： 溶*酶含量(μg/mL)=C 標準×△A 測定管÷△A 標準管×D=10×△A 測定管÷△A 標準管×D 2、按樣本鮮重計算： 溶*酶含量(μg/g)=(C 標準×V1)×△A 測定管÷△A 標準管×D÷(W×V2÷V) =10×△A 測定管÷△A 標準管÷W×D 3、按樣本蛋白濃度計算： 溶*酶含量(μg/mg prot)=(C 標準×V1)×△A 測定管÷△A 標準管×D÷(Cpr×V2÷V) =10×△A 測定管÷△A 標準管÷Cpr×D C 標準---標品濃度，200U/mL，即 10μg/mL； V1---標準品加樣體積，40μL=0.04mL； V2---樣本加樣體積，40μL=0.04mL； D---稀釋倍數，未稀釋即為 1； V ---提取液，1mL； W---取樣質量，g； Cpr---樣本蛋白質濃度，mg/mL；建議使用本公司的蛋白含量測定試劑盒。